故事发生在《夺宝奇兵3》之后19年，此时二战已经结束，冷战正打的火热。琼斯博士(哈里森·福特饰)已经是年过六十的老者，对钻山洞跳悬崖之类的极限运动却依然兴趣不减。这次他要寻找的宝物是玛雅文明的遗留物水晶头骨，但是一名苏联军队的女特工斯帕科(凯特·布兰切特饰)也盯上了这个有可能成为致命武器的好东西，她在全世界安排了大量手下来干掉琼斯博士。在边找边逃的过程中，琼斯遇到了一名不到20岁的大背头青年马特(希安·拉博夫饰)，马特载着琼斯逃过了苏联人的追击，并决定和琼斯一起去探险。为了得到更多水晶头骨的线索，琼斯博士找到了前女友玛丽昂(凯伦·阿伦饰)，玛丽昂惊讶的发现那个叫马特的青年就是她和琼斯的儿子，而两人对此还毫不知情。 就这样，打打闹闹的一家三口在经历了无数危险之后来到了秘鲁丛林，斯帕科率领的特工也一路跟踪来到了这里，双方将在这里展开最后的较量。与此同时，在进入玛雅古墓的时候，守卫水晶头骨的玛雅战士突然出现，把局势搅得更乱，琼斯博士要想带走水晶头骨，几乎就是一项不可能完成的任务……
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